壓力蒸汽滅菌器是實驗室生物安全的關鍵防護設備之一。 其中，脈動真空滅菌器利用機械抽真空的原理，使滅菌器內形成負壓，蒸汽得以迅速穿透物品內部，利用蒸汽釋放的潛熱滅菌 。 因其具有蒸汽穿透力強、滅菌效果可靠、滅菌時間短等優點，被生物安全三級實驗室廣泛使用。 但是在實際工作中，由于包裝不同、裝載量不同、排空方式不同，滅菌效果存在較大差異。 本試驗針對前期存在的防護服滅菌不合格的情況調整滅菌程序，并綜合運用物理、化學、生物監測法對新改的滅菌程序的有效性進行評價。

材料與方法

材料脈動真空滅菌器（上海博迅脈動真空滅菌器，設定壓力為相對壓力）；７件醫用一次性防護服（邦維高科Ｓ８）；滅菌袋（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ０１?８２８Ｄ，聚丙烯材質）；不銹鋼網狀球（直徑１０.８ｃｍ）；包內化學指示卡（３Ｍ１２４３Ａ）；生物指示物（福澤愛斯Ｈ３７２３Ｔ）。電熱恒溫培養箱（博迅ＨＰＸ?９１６２ＭＢＥ）；溫度壓力測定儀（意大利ＴＥＣＮＯＳＯＦＴ，所測壓力為絕對壓力）。１.２方法取７件新的防護服，抖開后，依次放入滅菌袋，將包內化學指示卡、生物指示物和溫度壓力探頭放入不銹鋼網狀球，然后將不銹鋼網狀球裹在最中間的那件防護服里面。將滅菌袋的袋口扎起來，并留出直徑約２ｃｍ的小孔，放入滅菌器。此外，滅菌器內裸露放置包內化學指示卡、生物指示物和溫度壓力探頭作為對照。分別運行調整前和調整后的滅菌程序。調整前的滅菌程序：排空３次（上限８０ｋＰａ、下限０ｋＰａ）、溫度１３２℃、時間１０ｍｉｎ。調整后的滅菌程序：脈動３次（上限８０ｋＰａ、下限－８０ｋＰａ）、溫度１３２℃、時間１０ｍｉｎ。程序運行結束后，撕開或用刀剖開防護服，取出指示物和溫度壓力探頭。觀察包內化學指示卡黑色條帶的爬行情況，若黑色條帶爬至“ＡＣＣＥＰＴ”區域，則滅菌合格；反之，則滅菌失敗。擠破生物指示物內含的安瓿，培養液浸潤菌片，５６℃培養４８ｈ，若培養液保持紫色，則滅菌合格；若培養液變黃，則滅菌失敗。只有２種指示物都指示合格，才能判定滅菌合格。此外，讀取溫度壓力探頭的記錄數據，分析溫度、壓力的變化情況。